期刊简介
1985年创刊，中华医学会主办。本刊是反映我国当代及与国外合作的，在内分泌代谢病学领域内临床与科研最新成果的高级学术刊物。在强调刊文的先进性、科学性与新颖性的同时，也十分重视临床的实用性和论文的可读性。本刊设指南与共识、述评、专论、论坛、临床研究、基础研究、综述、讲座、临诊应对、当年学术进展与动态、临床经验交流、新药研究、学术争鸣及国外期刊论文评论等栏目。本刊的读者对象主要为各级从事临床和基础内分泌代谢病学工作的医、教、研人员及研究生，以及内、外、儿、妇科以及神经、泌尿、老年、营养等相关科室的人员。
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首页>中华内分泌代谢杂志
- 杂志名称：中华内分泌代谢杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1000-6699
- 国内刊号：31-1282/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：92年12月获中华医学会华瑞杯优秀期刊三等奖期刊收录：CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
糖尿病大鼠局灶脑缺血/再灌损伤与脑组织TGF-β1 mRNA表达
王桂侠；李广仁；欧阳一冰；杨同书；王绍
关键词：糖尿病大鼠, 局灶脑缺血, 再灌损伤, 脑组织, Cerebral Ischemia, diabetic rats, 兴奋性氨基酸, 糖尿病模型, 梗死体积, 缺血再灌流, 动物模型, 紫外分光光度计, 激光密度扫描仪, 转化生长因子, 注射, 再灌注模型, 异硫氰酸胍法, 缺血性脑损伤, 聚合酶链反应, 缓冲液
摘要：在糖尿病高血糖情况下，明显加重缺血性脑损伤可能与乳酸堆积，兴奋性氨基酸，自由基及Ca2+超负荷有密切关系。已报告转化生长因子(TGF)可以使神经元细胞免受缺氧及兴奋性氨基酸的毒性作用，可以降低鼠和兔局灶脑缺血的梗死体积〔1，2〕，但是对于糖尿病脑梗死后细胞因子如TGF-β1 mRNA变化所知甚少。本研究在糖尿病模型基础上，进行脑局灶缺血及再灌注模型(MCAO)制备，研究糖尿病脑缺血/再灌注后脑组织内TGF-β1 mRNA表达的变化。 一、材料与方法 1.动物模型建立与分组：(1)糖尿病动物模型制备：雄性Wistar大鼠100只，体重200～250 g。禁食12小时，分为两组。实验组一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg，对照组只注射相应缓冲液，自由进食饮水。注射STZ后72小时测血糖大于16.7 mmol/L、尿糖持续阳性者选定为糖尿病模型动物。每周测体重一次，饲养2个月。(2)MCAO模型的制备：按刘亢丁〔3〕改良的腔内线栓法造成脑缺血。分成以下各组：糖尿病及对照组分别缺血2小时，缺血2小时后再灌24小时及假手术组，每组8只。 2.检测指标及方法：(1)梗死体积评定：动物于缺血再灌不同时间点断头处死。从额极开始间隔2.5 mm额状切片，立即置于1% 四氮唑化合物生理盐水中，37℃，30 min。未缺血区呈红色，梗死区呈白色。利用图像分析仪测定梗死面积后计算梗死体积。(2)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测缺血再灌流后脑组织TGF-β1 mRNA含量：组织总RNA的提取采用异硫氰酸胍法。用紫外分光光度计测定所获RNA的A260/A280处的OD比值为1.89±0.08，经电泳每组均见28s及18s核糖体RNA条带，其OD比值接近于2。引物由上海生物工程公司合成。序列为：TGF-β1有义链5'-ACCCGCGTGCTAATGGTGGAC-3'，反义链5'-GAGCAG～GAAGGGTCGGTTCAT-3',产物453bp;r-actin有义链5'-ATGGAAGAAGAAATCGCCGC-3'，反义链5'-ACACGCAG～CTCGTTGTAGAA-3'，产物287bp。应用华美公司提供RT-PCR所需的酶及缓冲液系统，进行TGFβ1 mRNA RT-PCR扩增。电泳后摄片，激光密度扫描仪扫描底片，并计算曲线下峰面积作为PCR产物的含量。
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