期刊简介
1985年创刊，中华医学会主办。本刊是反映我国当代及与国外合作的，在内分泌代谢病学领域内临床与科研最新成果的高级学术刊物。在强调刊文的先进性、科学性与新颖性的同时，也十分重视临床的实用性和论文的可读性。本刊设指南与共识、述评、专论、论坛、临床研究、基础研究、综述、讲座、临诊应对、当年学术进展与动态、临床经验交流、新药研究、学术争鸣及国外期刊论文评论等栏目。本刊的读者对象主要为各级从事临床和基础内分泌代谢病学工作的医、教、研人员及研究生，以及内、外、儿、妇科以及神经、泌尿、老年、营养等相关科室的人员。
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首页>中华内分泌代谢杂志
- 杂志名称：中华内分泌代谢杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1000-6699
- 国内刊号：31-1282/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：92年12月获中华医学会华瑞杯优秀期刊三等奖期刊收录：CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
自身免疫性甲状腺病与促甲状腺激素受体基因突变的关系
吕晓虹；雒文田；马秀萍；魏枫；王莉
关键词：自身免疫性, 甲状腺病, 促甲状腺激素受体, 基因突变, thyrotropin receptor, 外显子, 引物, 琼脂糖凝胶电泳, 桥本甲状腺炎, 扩增产物, 甲状腺疾病, 细胞突变, 限制性片段长度, 弥漫性甲状腺肿, 聚合酶链式反应, 甲状腺功能测定, 自身免疫疾病, 预变性, 循环, 限制性内切酶
摘要：自身免疫性甲状腺病(AITD)是一组器官特异性自身免疫疾病。主要包括Graves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)和原发性粘液性水肿。促甲状腺激素受体(TSHR)是AITD发病中重要的自身抗原，对其遗传变异的研究具重要意义。人类TSHR基因位于染色体14q31处，全长60 kb，包括10个外显子和9个内含子，第1至9号外显子编码TSHR氨基酸膜外区的部分，跨膜区和膜内区部分由第10号外显子编码〔1〕。研究表明，自主性功能性甲状腺腺瘤，遗传或散发性毒性甲状腺增生症，先天性甲减等多种甲状腺疾病与TSHR基因突变密切相关，对于Graves病和桥本甲状腺炎，这方面的研究较少。目前有G205C体细胞突变，C253A原始细胞突变的报道〔2，3〕，但尚存争议。本研究初步探讨AITD与TSHR基因突变的关系。 一、对象和方法 1.对象：123例无亲缘关系的西北地区汉族人。其中GD患者48例(男15例，女33例)，均具典型的高代谢症群，不同程度弥漫性甲状腺肿，实验室检查符合甲亢改变。大部分经甲状腺病理学检查确诊。HT患者50例(男4例，女46例)，根据甲状腺肿大，甲状腺自身抗体滴度及甲状腺病理检查确诊。健康人25例(男7例，女18例)，均无甲状腺疾病史及家族史，甲状腺功能测定在正常范围。 2.方法：(1)基因组DNA的提取：采外周血5 ml(ACD抗凝)，分离单个核细胞，饱和酚/氯仿抽提基因组DNA。(2)聚合酶链式反应(PCR)：引物1：上游引物5'-TCCCG～GGTCTCCTTTGGCCT-3'(position 5-24)，下游引物5'-GGTACTCACAGAGTCTGCGT-3'(position 269-259及9个第1号内含子碱基序列)，扩增第1号外显子，长度274bp。引物2：上游引物5'-ATCCTTGAGTCCTTGATGTG-3'(position 982-1001)，下游引物5'-TACTCTTCTGAGATTTGG～CC-3'(position 2375-2356)，扩增第10号外显子，长度1394bp(中科院微生物研究所合成)。反应体系50 μl，含模板DNA 200～500 ng，上下游引物各0.25 μmol/L，dNTP各200 μmol/L(SABC)，Taq DNA聚合酶1.25 U，10×PCR缓冲液5 μl,Mg2+ 1.5 mmol/L(上海生工)。循环参数设置：①扩增第1号外显子。94℃预变性90秒，94℃，60秒，55℃，60秒，72℃，60秒，30次循环，72℃后延伸5分钟。②扩增第10号外显子。94℃预变性90秒，94℃，60秒，55℃， 60秒，72℃，90秒，30次循环，72℃后延伸5分钟。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳证实。(3)限制性片段长度多态性分析(RFLP)：选取Taq Ⅰ(SABC)、Msp Ⅰ(SABC)、Hinf Ⅰ(MBI)、Bsr Ⅰ(MBI)四种限制性内切酶，对扩增产物进行酶切，琼脂糖凝胶电泳观察结果。 3.统计学处理：行列表χ2检验。
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