期刊简介
1985年创刊，中华医学会主办。本刊是反映我国当代及与国外合作的，在内分泌代谢病学领域内临床与科研最新成果的高级学术刊物。在强调刊文的先进性、科学性与新颖性的同时，也十分重视临床的实用性和论文的可读性。本刊设指南与共识、述评、专论、论坛、临床研究、基础研究、综述、讲座、临诊应对、当年学术进展与动态、临床经验交流、新药研究、学术争鸣及国外期刊论文评论等栏目。本刊的读者对象主要为各级从事临床和基础内分泌代谢病学工作的医、教、研人员及研究生，以及内、外、儿、妇科以及神经、泌尿、老年、营养等相关科室的人员。
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首页>中华内分泌代谢杂志
- 杂志名称：中华内分泌代谢杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1000-6699
- 国内刊号：31-1282/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：92年12月获中华医学会华瑞杯优秀期刊三等奖期刊收录：CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
肿瘤坏死因子α诱导位点特异性 DNA去甲基化促进基质金属蛋白酶9的表达
凌厉；任萌；黎锋；杨川；严励
关键词：表皮角质细胞, DNA, 去甲基化, 肿瘤坏死因子 α, 金属基质蛋白酶 9
摘要：目的：研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导位点特异性 DNA 去甲基化促进人表皮角质细胞基质金属蛋白酶9( MMP9)的表达。方法用10 ng/ ml 的 TNF-α或2.5μmol/ L 的5-氮杂-2＇-脱氧胞苷(DAC)联合300 nmol/ L 的曲古菌素 A (TSA)处理人表皮角质细胞株 HaCaT 细胞,采用实时荧光定量 PCR (Real-time RT-PCR)检测各组细胞 MMP9 mRNA 水平,采用蛋白质印迹(Western Blot)及酶联免疫吸附法(ELISA)检测 MMP9蛋白的表达水平。应用亚硫酸氢钠修饰后测序法(BSP)及甲基化敏感性高分辨率熔解曲线法(Ms-HRM)检测 TNF-α干预细胞后 MMP9启动子区 DNA 甲基化改变差异大的 CpG 位点。构建不同位点甲基化的 MMP9启动子-荧光素酶报告基因重组质粒,检测特异性位点的 DNA 甲基化状态改变对 MMP9启动子转录活性的影响。结果各培养时间点,TNF-α干预组均较相应 PBS 对照组 HaCaT 细胞的 MMP9表达量升高,且差异均有统计学意义(P<0.05)；经实时 RT-PCR、蛋白质印迹和 ELISA 三种方法分别检测到的 MMP9 mRNA 和蛋白表达量随干预时间的变化趋势一致,均为先升高后下降。 TNF-α干预后MMP9启动子区的10个 CpG 位点均发生不同程度的 DNA 去甲基化改变,其中-36 bp 位点改变的差异有统计学意义(P<0.05)。-36 bp 位点去甲基化后,MMP9转录活性明显提高。 TNF-α干预后 MMP9启动子区的10个 CpG 位点均发生不同程度的 DNA 去甲基化改变,其中-36 bp 位点改变的差异有统计学意义(P<0.05)。-36 bp 位点去甲基化后,MMP9转录活性明显提高。结论 TNF-α通过诱导 HaCaT 细胞MMP9基因启动子-36 bp 位点 DNA 去甲基化上调 MMP9表达。
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